Diferenciador é o nome dado às substâncias utilizadas na etapa de diferenciação da técnica de Gram. Os diferenciadores são, nesta ordem de uso, a acetona e o álcool. Nesta etapa de diferenciação, as bactérias gram-positivas coram-se de roxo e as bactérias gram-negativas descoram-se por possuírem uma parede celular menos espessa em relação à parede das gram-positivas.
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